الكشف عن البروتين

 

التجربة الخامسة عشرة

 

 

هـدف التجربـة

 

 

 

     تكشف عن البروتين في زلال البيض بوساطة طريقة بيوريت.

 

 

الأساس النظري

 

 

 

     درست أن البروتينات مركبات عضوية معقدة وأن الحموض الأمينية هي وحدات البناء فيها. وعرفت أن البروتين يدخل في تركيب الخلايا والأنسجة، وفي تركيب الأجسام المضادة التي تدافع عن الجسم عند تعرضه للمرض، وتدخل البروتينات في تكوين الشعر والأظافر والعضلات، وفي تركيب الأنزيمات التي تحفز كثيراً من التفاعلات الحيوية.

     ويستخدم محلول كبريتات النحاس (II) القاعدية للكشف عن البروتينات، حيث يتكون مركب معقد من ترابط نتروجين البروتين وأيونات النحاس (II) المسمى بيوريت كما هو موضح بالشكل الآتي:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

الأدوات اللازمة

 

 

 

     كؤوس زجاجية (500 مل) عدد ( 4 )، أنابيب اختبار عدد ( 4 )، حامل أنابيب اختبار، ساق زجاجية، قطارة.

 

 

المواد اللازمة

 

 

 

      محلول زلال بيض، عينات من : حليب، أرز، سمك، جيلاتين، محلول هيدروكسيد الصوديوم NaOH تركيز (10% بالكتلة)، محلول كبريتات النحاس (II) ا1% CuSO4 قطارة عدد ( 3 ).

 

 

خطوات العمل

 

 

 

1-     أضف قرابة (10 مل) ماء مقطر إلى بياض بيضة، واخفقه جيداً بوساطة ساق زجاجية حتى تحصل على محلول.

2-     ضع (2 مل) من المحلول السابق في أنبوب اختبار، وأضف إليها (2 مل) من محلول NaOH (ا10%).

3-     اخلط المزيج جيداً بوساطة ساق زجاجية.

4-     أضف بضع قطرات من محلول كبريتات النحاس (II) ا1% للمحلول السابق. ماذا تلاحظ؟

5-     أضف مزيداً من محلول كبريتات النحاس (II) ا1% إلى أن يصل إلى (10) قطرات، لاحظ لون المحلول.

عندما تحصل على كشف إيجابي عن البروتين، خفف تركيز العينة إلى النصف، وأضف إليها الكاشف، ماذا يحصل لكثافة اللون الناتج؟

كرر الخطوات مع عينات من الحليب والأرز والسمك والجيلاتين وسجل النتائج.

 

جدول النتائج

نسبة البروتين التقريبية من العينة

لون المحلول

أثر العينة

نوع العينة

 

 

زلال بيض

 

 

حليب

 

 

أرز

 

 

سمك

 

 

جيلاتين

 

التقويم

 

 

1- سخن محلول زلال البيض على نار مدة (5) دقائق ثم اكشف عن البروتين فيه. وسجل النتائج.

2- هل تستطيع أن تكشف عن بروتين صفار البيض بالطريقة نفسها؟ علل.

3- ما علاقة كثافة اللون البنفسجي وتركيز البروتين؟ علل.

4- باستخدام أحد الحموض الأمينية المتوافرة في مختبر مدرستك. توصل إلى: هل يمكن الكشف عن الحموض الأمينية بالطريقة التي استخدمتها في الكشف عن البروتين؟ علل.

 

 

نشاط إضافي

 

 

        (الكشف عن البروتين في البقوليات)

1-   احصل على كمية قليلة من " جريش " العدس، والفول، والحمص، أي مادة قرنية متوافرة.

2-      انقع جريش كل مادة مدة يوم من الماء في كأس زجاجية 500 مل.

3-      افصل السائل عن الجريش في كل كأس بالترشيح.

4-      خذ (2 مل) من كل راشح وضعه في أنبوب اختبار.

5-      أضف لكل أنبوب (2 مل) من محلول NaOH السابق.

6-   أضف بضع قطرات من محلول كبريتات النحاس (II) ا1% المحضر سابقاً، ولاحظ كثافة اللون الناتج.

7-      أي المواد التي فحصتها تحتوي على البروتين؟

8-      قارن النتائج التي حصلت عليها لكل مادة غذائية مع زلال البيض.